分析機器の検量線を作ってます。 blank溶液とcontrol溶液の違いを詳しく教えてください。どうぞよろしくお願いします。

英和辞書を引くと blank=白紙 control=抑制と載っているのではないでしょうか。ブランク実験は何も入れない実験です。分析溶液：水：場合によってはバッファーコントロール実験は反応を抑制している実験です。分析溶液：基質のみ（酵素をいれない）：阻害剤をいれる。

こんばんは人や分野によって多少違いがあるかもしれませんが、 Blankはその名の通り、溶媒だけでゼロ値やバックグラウンドとして分析するもの、 Controlはわかっている濃度の試料、内部標準を入れて処理した試料などと考えています。 BlankはControlに含まれるのかもしれません。誤解があると困るのでControlという名前はあまり使っていません。

私の場合は、コントロール溶液：分析値がある特定の値になるように分析対象を含んでいる溶液ブランク溶液：分析対象を含んでおらず、値がゼロかバックグランドになる溶液で使い分けています。

blank溶液とcontrol溶液の違い -分析機器の検量線を作ってます。blank- 化学

Qブランク

化学実験において、0.1ＮのＮａＯＨでフェノールフタレインを指示薬として滴定し、もとの原料についてブランクをとる。との記載があるのですが、このブランクの意味と、操作がわかりません。
どなたか教えてくださいますようお願いします。

Aベストアンサー

>溶液の色（フェノールフタレイン）が無色になるまで加えたＮａＯHの
>滴定値（ｍｌ）を試料から引いてやるということなのでしょうか？

そうなります。
目的の試料を入れていない状態で滴定し、試料を入れた状態での滴定量
から引いた値が、試料を中和するのに必要なNaOH水溶液の量となります。

[試料溶液の滴定量]－[ブランク値]＝試料を中和するのに必要なNaOH水溶液量

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Qブランク値って・・・

吸光光度法のブランク値ってなんですか？

Aベストアンサー

ブランク（blank）＝空白。
測定したい溶質を含まない溶媒だけを分光光度計のセルに入れて測定し、
検量線のゼロ点にあたる値を測ります。これがブランク値です。
これにより、妨害物質や使用セルの光路長に由来する誤差の影響を
排除することができます。

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Q吸光度の単位

吸光度の単位は何でしょうか!?
一般的には単位はつけていないように思われるのですが。。
宜しくお願いします。

Aベストアンサー

物理的には、No.1さんも書かれているように吸光度も透過度も基本的に同じ単位系の物理量どうしの「比」なので「無単位」です。しかし、無名数では他の物理量、特に透過度と区別が付かないので、透過度は"透過率"として「％」を付けて表し、"吸光度"は「Abs（アブス）」を付けて呼ぶのが業界（分析機器工業会？）のならわしです。

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Q検量線

検量線とはどういったものなのか？
検量線を引くとはどういったことをすればいいのかおしえてください。

Aベストアンサー

masazo27さんの2番煎じとなりますが、改めて説明を試みたいと思います。
検量線を引くとは、測定器の固有差を見極め、その固有差を見極めた上で、未知試料について正確な測定を行うことを目的にしています。
例えば、ある水溶液中の砂糖の濃度を知ることが目的であるとします。砂糖の濃度を知ることが目的の検量線とは、砂糖0.1g、0.2ｇ、0.3gをそれぞれ1Lの水に溶かし（あらかじめ濃度が既知の試料を作成し）、それを測定器にかけ、測定器の指示値を記録します。それを、横軸を濃度、縦軸を指示値にとったグラ...続きを読む

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Q吸光光度法の検量線について

検量線を作成し、データーにばらつきが生じた場合はどのようにすべきなんでしょうか。無理やり線でつなぐのかなと思っているのですが・・回答をお願いします。

Aベストアンサー

　検量線を引くための標準液は、0を含めて、６点取っています。標準液を調製しやすいように、例えば、0、1、2、3、4、5 mg/mlなど。これを５点検量(0は、普通対照に利用するので)と称しています。４点の場合もあります。
　基本は、グラフを書いて、１点がヅレていたら、それは無視して検量線を引く。２点ズレテイタラ、こりはヒドイので、やり直す、と言うのが教科書です。

　正確にするために検量線を２連(2回)して、その平均を取る、というバカな教えをする教員もいますが(それなら、２連より１０連、１００連の方が正確、と毒づいています)。
　
　実験のテクニックが難しくて、全体がばらつく場合もあります。この場合は、５点ではなく、１０点とか、測定する回数を増やしたりして、信頼性を高めるしかありません。検量線は、もちろんパソコンで引きます。また、サンプルの測定も、一回だけではなく、数回測定して、平均値を去る必要があります。

　化学反応は、バラツキマセン。しかし、生物のサンプルは、個体差があるので、最低３回は測定して、平均と標準偏差を示します。例えば、血糖値を測定するときに、血液中のグルコースの測定は、ばらつかないので１回で十分。しかし、A、B、Cサンそれぞれの値は異なるので、ヒトの血糖値となると、最低３人は測定しなければなりません。
　同じサンプルを測定して、値がばらつくのは単に腕が悪いだけです。学生だと5%程度、慣れると2%以内、分析のプロだと0.5%の誤差でもウルサク言います。
データがばらつく原因を考え、検量線とサンプルの測定回数を決めてください。

>無理やり線でつなぐのかなと思っているのですが
測定した点をつないだりしているのでしょうか。それはヤリマセン。昔は、測定した点の近くをなるべく通る直線(場合によっては曲線)を、慣れを頼りに引いていました。今ではパソコンがあるので、回帰式を出します。これが検量線になります。最近は、機器に検量線を自動的に描き、濃度まで計算しているのが、普通です。
　回帰式の相関係数が、0.98以上あれば信頼していますが、0.95だとやり直すかどうか迷います。

　検量線を引くための標準液は、0を含めて、６点取っています。標準液を調製しやすいように、例えば、0、1、2、3、4、5 mg/mlなど。これを５点検量(0は、普通対照に利用するので)と称しています。４点の場合もあります。
　基本は、グラフを書いて、１点がヅレていたら、それは無視して検量線を引く。２点ズレテイタラ、こりはヒドイので、やり直す、と言うのが教科書です。

　正確にするために検量線を２連(2回)して、その平均を取る、というバカな教えをする教員もいますが(それなら、２連より１０連、１０...続きを読む

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Q分光光度計での測定手順

分光光度計である溶液の濃度を測定しています。
人によって二つのやり方があることが分かり、どちらが正しいかを検討しています。
ちなみにダブルビームです。
（方法１）
・キュベットＡとＢに水を入れてゼロ補正
・次にキュベットＡにブランク、キュベットＢにサンプルを入れて吸光度の差を測定する。
（方法２）
・キュベットＡに水、キュベットＢにブランクを入れてゼロ補正
・次にキュベットＡに水、キュベットＢにサンプルを入れて測定。
・ブランクとサンプルのそれぞれの吸光度の差を計算する。

どちらでも良いという人と、差があるようだという人と分かれています。どなたか教えてください。

Aベストアンサー

以前、分光光度計の設計をやっていました（早い話、作る方のプロでした）。

操作上のミスや誤差を抜きにして言えば、装置的には優位な誤差に違いは
ないように思いますが、分光光度計の設計者が想定している使用方法は、
きっと（方法１）ですね（ひょっとして私だけだったらごめんなさい）。

関係しそうなポイントをいくつか挙げておきます。

１．ゼロ補正は、再現可能性の高いものを基準として実施した方が良い。
　　つまり、今日も明日も明後日も、特別なアクセサリを使用せず、
　　いつものキ...続きを読む

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Qエクセル　STDEVとSTDEVPの違い

エクセルの統計関数で標準偏差を求める時、STDEVとSTDEVPがあります。両者の違いが良くわかりません。
宜しかったら、恐縮ですが、以下の具体例で、『噛み砕いて』教えて下さい。
（例）
セルA1～A13に1～13の数字を入力、平均値＝７、STDEVでは3.89444、STDEVPでは3.741657となります。
また、平均値7と各数字の差を取り、それを２乗し、総和を取る(182)、これをデータの個数13で割る(14)、この平方根を取ると3.741657となります。
では、STDEVとSTDEVPの違いは何なのでしょうか？統計のことは疎く、お手数ですが、サルにもわかるようご教授頂きたく、お願い致します。

Aベストアンサー

データが母集団そのものからとったか、標本データかで違います。また母集団そのものだったとしても（例えばクラス全員というような）、その背景にさらならる母集団（例えば学年全体）を想定して比較するような時もありますので、その場合は標本となります。
で標本データの時はSTDEVを使って、母集団の時はSTDEVPをつかうことになります。
公式の違いは分母がn-1（STDEV）かn（STDEVP）かの違いしかありません。まぁ感覚的に理解するなら、分母がn-1になるということはそれだけ結果が大きくなるわけで、つまりそれだけのりしろを多くもって推測に当たるというようなことになります。
AとBの違いがあるかないかという推測をする時、通常は標本同士の検証になるわけですので、偏差を余裕をもってわざとちょっと大きめに見るということで、それだけ確証の度合いを上げるというわけです。

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Q脱イオン水、MilliQ、蒸留水　の違いを教えて下さい

こんにちは。お世話になります。

バイオ、生化学系の実験に従事しているものですが「水」について教えて下さい。

水道水、脱イオン水、MilliQ、蒸留水（二段蒸留水）、超純水の違いを教えて下さい。
お互いの関係などありましたら（○○を～すると△△になる等）教えていただけると
わかりやすいかもしれません。

また、実験内容によってはエンドトキシンを気にする実験もありますが、エンドトキシンフリーの水を使う場合はどれを選べばよいのでしょうか？
動物細胞培養用に使う場合はどの水を選べばよいのでしょうか？

よろしくお願いいたします。

Aベストアンサー

pinokoBBさん、こんにちは。

バイオ・生化学関係に用いられる水は水道水をプレフィルターを通し、イオン交換・蒸留・逆浸透法、限外濾過などを複数回組み合わせて生成します。

プレフィルターは鉄さびや大き目のゴミを取り除くに用います。

イオン交換法は酸性・強アルカリ性の樹脂を通し、イオン化合物を除く方法でこれを行った水がイオン交換水（脱イオン水）です。水の純度の評価には比抵抗を用いますが、およそ数百ｋΩ・cmの水が得られます。この段階で除けるのはイオン化合物だけで有機物・微生物は除けません。

蒸留法は水を蒸留することで不純物を除く方法です。イオン交換法と組み合わせて2回蒸留することが一般的です。一般的な2次蒸留水の比抵抗は数MΩ・cmでバイオ・生化学関係には十分な純度です。動物培養細胞にも使用可能です。エンドトキシンも完全にフリーとまではいかないけれどもある程度の除去はできています。蒸留法は多くの不純物を除去可能ですが100度付近の沸点を持つ物質は除けません。

逆浸透法は半透膜に圧力をかけて精製する方法です。

限外濾過法は限外濾過膜を通す方法です。孔径は半透膜が数十nmに対し、限外濾過膜は数nmです。それゆえ、数kDa以上の分子であれば、限外濾過法で除けますので、エンドトキシンやRNaseなども除去できます。本当にエンドトキシンフリーな水が必要でしたら限外濾過法を行った水が必須です。ただ、普通のCOSとかHEKとかの動物細胞培養でしたら2次蒸留水でも十分です。蛍光検出用のマイクロアレイなんかは限外濾過水が必須なようです。

超純水は十数MΩ・cmの水のことです。MilliQはミリポア社の超純水装置を用いて作った水で比抵抗は15MΩ・cm以上と高純度の水です。MilliQに関してはイオン交換樹脂を通し、逆浸透法、限外濾過法を用いて精製しているようです。

＞また、実験内容によってはエンドトキシンを気にする実験もありますが、エンドトキシンフリーの水を使う場合はどれを選べばよいのでしょうか？
これに関しては上で書いたように限外濾過膜で精製した水です。MilliQが当てはまるでしょう。（超純水も一般的には限外濾過をしているのでこれも当てはまりますかね。）

＞動物細胞培養用に使う場合はどの水を選べばよいのでしょうか？
これは、2次蒸留水以上の純度があれば十分です。2次蒸留水、MilliQ水、超純水が使用できます。

ただ、水関係の装置は日頃のメンテナンスが重要でイオン交換樹脂とか水を貯めるタンク、蛇口に汚染がないかは確認する必要があります。

実験書には必ずはじめのほうに書いてあることですので、pinokoBBさん自身でなにか実験書をご参照ください。

pinokoBBさん、こんにちは。

バイオ・生化学関係に用いられる水は水道水をプレフィルターを通し、イオン交換・蒸留・逆浸透法、限外濾過などを複数回組み合わせて生成します。

プレフィルターは鉄さびや大き目のゴミを取り除くに用います。

イオン交換法は酸性・強アルカリ性の樹脂を通し、イオン化合物を除く方法でこれを行った水がイオン交換水（脱イオン水）です。水の純度の評価には比抵抗を用いますが、およそ数百ｋΩ・cmの水が得られます。この段階で除けるのはイオン化合物だけで有機物・微生物は...続きを読む

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Q検量線について・・・。

比色分析実験の過マンガン酸カリウム溶液による検量線の作製でレポートと一緒にグラフも提出するようになっています。検量線の引き方が分かりません。担当の先生は「適当に引いてていいけど本当はここしか引けない所がある。」と言っていました。その「ここしか引けない」検量線の求め方を教えてください。
説明不足だったらすみません。

Aベストアンサー

>ここしか引けない所
　は、Zero点です。
　濃度Zeroの吸光度は、Blank値が有るにせよ、Zeroにならなければいけません。
　従って、Graph上で原点を通る様に引きます。
　測定誤差があるので、最少自乗法では殆どの場合、原点を通る様にはならず、目分量で物差しを当てた線もなかなかどうして、立派なものですよ。
　Excelで原点を通る様に設定する事は簡単ですが、結局、内容は物差しで原点を通すのとあまり変わりません。

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Q検量線の計算方法について

こんにちは。
現在HPLCを扱っております。検量線を使っているのですが
計算方法がよく理解できておりません。
【化粧品100g中に有効成分Aは何g含まれているか】を求めるものです。
まず、
標準品　0g、0.1g、0.3g、0.5g　を精密に量り、全て精製水で正確に
100mlとします。この各液から、さらに1mlを精密に量りとり、精製水を
加えて正確に100mlとします。

試料は　1mlを精密に量り、精製水を加えて正確に100mlとしました。

ピークのAREAですが【標準品】
0.1g→　574221
0.3g→　1671182
0.5g→　27...続きを読む

Aベストアンサー

ちょっと整理するために長くなりますが、順番に書きますね。

１．まず検量線に用いた標準溶液の濃度をきちんと計算しましょう。
○標品　0g、0.1g、0.3g、0.5g
　→mgに換算すると0mg, 100mg, 300mg 500mg
○全て精製水で正確に100mlとする
　→濃度は0mg/ml, 1mg/ml, 3mg/ml, 5mg/ml
○1mlを量りとり精製水を加え100mlとする（100倍希釈）
　→濃度は0mg/ml, 0.01mg/ml, 0.03mg/ml, 0.05mg/ml
　→μgに換算すると0μg/ml, 10μg/ml, 30μg/ml, 50μg/ml

２．計算した濃度（μg/ml）を横軸xに、HPLCで得られた面積の値を縦軸yにしてグラフを描きます（エクセルならば散布図ですね）。
この時、0μg/mlの試料を分析したときの値も使いましょう（ピークが出ないのならば、面積は0とする）。

３．近似式を追加して検量線の式を計算させると、
　　　y = 54291x + 19103　　R2 = 0.9997
となります。

４．これで検量線ができたので、未知試料を分析したときのピーク面積1738876をyの部分に代入して計算します。

５．xの値として31.6769...（μg/ml）と出てきます。

６．この値はあくまでも"分析した試料"の濃度です。目的としている化粧品1mlを100mlに希釈したものがこの濃度であることから、化粧品中の濃度は100倍して約3158（μg/ml）となります。mgやgに換算しなおすと、それぞれ3.2mg/ml、0.0032g/mlとなります。

７．もし【化粧品"100ml"中に有効成分Aは何g含まれているか】ということならば、単純に濃度に100mlをかけて、0.32gとなります。
ここで注意が必要なのは、【化粧品"100g"中に有効成分Aは何g含まれているか】となっていることです。厳密には100mlと100gは同じ量を表していません。化粧品100mlの密度（g/ml）が分かればこの値を0.32にかければ【化粧品"100g"中に有効成分Aの量】が出せます。密度が不明なときは、例えば100mlを正確に量り取ってから、その質量を精密天秤で測ってください。質量÷体積で密度が計算できます。

ちょっと整理するために長くなりますが、順番に書きますね。

１．まず検量線に用いた標準溶液の濃度をきちんと計算しましょう。
○標品　0g、0.1g、0.3g、0.5g
　→mgに換算すると0mg, 100mg, 300mg 500mg
○全て精製水で正確に100mlとする
　→濃度は0mg/ml, 1mg/ml, 3mg/ml, 5mg/ml
○1mlを量りとり精製水を加え100mlとする（100倍希釈）
　→濃度は0mg/ml, 0.01mg/ml, 0.03mg/ml, 0.05mg/ml
　→μgに換算すると0μg/ml, 10μg/ml, 30μg/ml, 50μg/ml

２．計算した濃度（μg/ml）を横軸xに、HPLCで得られた面...続きを読む

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