No.3
- 回答日時:
#2の者です。
どうしてもその基質でないといけないのであれば、溶けてない状態(懸濁した状態)で評価を行うべきではないかと思います。リパーゼ等の評価方法を参考になされてはいかがでしょうか?
また、どうしても水にできるだけ溶かしたいのであれば、一度高温で溶解させた後徐々に冷やすと、過飽和水溶液が出来ますので、試してみてはいかがでしょうか?
他に安定化剤を用いれば比較的高温での反応を可能にすることもできるかと思います。
No.2
- 回答日時:
どうしてもその基質でないといけないのでしょうか?
または、そもそも溶けないものを何故酵素反応のターゲットに選んだのでしょうか?
方法としては、#1の方のおっしゃるような溶解を補助するような方法をとるか、温度を上げるか、基質を誘導体化して溶解度を上げるか、pHを変えるか、といったものになると思いますが、その実験の目的・性質に合わせた選択が必要になると思います。
この回答への補足
クローニングしてきた酵素の機能確認なので、どうしてもこの基質でなくてはならないのです。
温度に関しては多少加温したくらいでは溶けませんでした。
誘導体に関しては配糖化すれば水に溶けることが分かっているのですが、それではこの酵素の機能確認に使えません。
pHもアルカリにすれば溶けるのですが、酵素が失活するくらいの高pHになってしまいます。
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